MCP-1/CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究
丁
鹏1,2， 路
钢1,2， 杨智勇1，
王进昆1， 余化霖1，
薛黎萍3， 李园园1,2，
冯忠堂2， 林荣安4
（
1. 昆明医学院第一附属医院神经外科， 云南 昆明
650032； 2. 昆明医学院生物医学工程研究中心脑研究室，
云南 昆明 650031；
3. 云南省第二人民医院， 云南 昆明
650021； 4. 新加坡国立大学解剖系，新加坡
117597）
摘
要： 【目的】 探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2在骨髓基质细胞（MSC）体内、外迁移中的作用。【方法】
体外培养、纯化大鼠MSC，取第五代MSC行免疫荧光鉴定；免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况；Boyden
小室法检测趋化因子MCP-1（5
～ 500 ng/mL）对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究（脊髓全横断组24只，假手术组9只，正常大鼠9只），分别于术后1，3，7，14
d取材，行免疫组化检测MCP-1表达，或行MCP-1的Real-time
PCR定量分析，或颈内静脉注射荧光标记的MSC，观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin；细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2；MCP-1（5
～ 500 ng/mL）体外可趋化MSC迁移（P﹤0.05），抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用（P﹤0.05）。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1，但细胞分布、染色存在差异，影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1
RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义（P
< 0.05），术后14 d时MCP-1
RNA与正常对照相比差异无统计学意义（P ＞
0.05），伴随其变化，脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义（P﹤0.05）。【结论】
MCP-1体内、外可趋化MSC迁移，MCP-1/CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。
关键词：骨髓基质细胞；趋化因子；迁移；脊髓损伤
中图分类号：R329.28
文献标识码： A
文章编号：1672-3554（2008）02-0121-05