四种细胞因子组合从小鼠骨髓细胞体外诱导优势不成熟CD 8a ⁺DC

纳   宁¹， 罗   云¹， 洪良庆¹， 欧阳斌¹， 黄正宇¹, 缪   斌¹， 华学峰¹， 杨培生¹，徐   琳²

（ 中山大学   1． 附属第三医院肾移植科； 2． 中山医学院免疫教研室， 广东 广州   510080 ）

      摘   要： 【目的】 探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟CD 8a +DC（DC2）的新方法。【方法】 取小鼠骨髓细胞，采用GM-CSF 5 ng/mＬ，IL-4 20 ng/mＬ，Flt 3L 25 ng/mＬ，SCF 100 ng/mＬ 4种细胞因子组合， 37℃ ，5％CO₂体外培养诱导。第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型，细胞计数分析总细胞产量，采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态。【结果】 小鼠骨髓细胞经GM-CSF+IL-4+Flt 3L +SCF 诱导第3天在CD 11c +的DC细胞群中可产生97.09％的CD 8a ⁺ 优势DC2细胞（占总细胞的34.6％），其中CD 8a ⁺MHCⅡ-的不成熟DC占61.77％；随培养时间延长比例下降，但培养第16天时CD 8a ⁺的不成熟DC仍占优势。总细胞计数分析显示随培养时间延长，细胞总数下降。电镜、免疫荧光及相差摄影等形态学检查显示所诱导的DC呈现典型树突状形态特征。【结论】 GM-CSF+ IL-4+ Flt 3L +SCF可以体外快速诱导小鼠骨髓细胞产生大量优势不成熟CD 8a + DC，是体外制备不成熟DC2的一种较好的新方法。

      关键词：不成熟树突状细胞； 细胞因子； 骨髓细胞

      中图分类号：R392            文献标识码： A            文章编号：1672-3554（2008）02-0126-05