沉默BIRC7基因的Jurkat稳定细胞系建立
吴红阳1,2,
林汉良1, 朱有凯1,
古聪敏1, 叶子茵1,
张 萌1
(
1.中山大学附属第一医院病理科,
广东 广州 510080;
2. 安徽医科大学第一医院肿瘤内科, 安徽 合肥
230022 )
摘
要: 【目的】 通过RNA干扰技术(RNAi)建立稳定性BIRC7基因沉默的Jurkat实验细胞模型。
【方法】 应用pSilencer 4.1-CMV neo 构建BIRC7
shRNA 表达载体,采用脂质体将载体导入Jurkat
细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA
细胞后,行RT-PCR 和Western
blot 等技术检测细胞BIRC7表达水平。
【结果】成功筛选出分别携带二种重组shRNA表达的Jurkat细胞系。与对照组细胞相比,转染BIRC7
shRNA的细胞BIRC7 mRNA表达下降约 >
70%,BIRC7蛋白表达减少 >
60%。生长曲线显示生长速度减慢,细胞倍增时间延长,细胞凋亡率增加。【结论】
稳定转染重组BIRC7 shRNA表达载体能有效干扰BIRC7基因表达,表明RNAi技术可以成为研究BIRC7基因功能的有效工具。BIRC7有可能成为T-淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤治疗的潜在新靶点。
关键词:白血病;
BIRC7; RNAi; Jurkat稳定细胞系
中图分类号:R392.3
文献标识码: A
文章编号:1672-3554(2008)02-0139-05